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土壤硝酸还原酶(Solid-Nitrate Reductase,S-NR)试剂盒说明书

点击次数:1052 日期:2018/11/19 16:41:55

土壤硝酸还原酶(Solid-Nitrate ReductaseS-NR)试剂盒说明书
                                    分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
S-NR 催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究 S-NR  的活性
对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。
测定原理
S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ  +NADH+H  →  NO2ˉ +NAD+  +H 2 O;产生的亚
硝酸盐能够在酸性条件下,与对氨基苯磺酸及  α -  萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的
红色偶氮化合物在  540 nm  有最大吸收峰,可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:液体 10mL×1瓶,-20℃保存。
试剂二:液体 4mL×1瓶,-20℃保存。
试剂三:液体 12.5mL×1瓶,4℃保存(如出现结晶析出,60-90℃水浴溶解后使用)。
试剂四:液体 12.5mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:标准品储备液 1mL-20℃保存。
0.1μmol/mL标准液的配制:用时将试剂五稀释100倍,即取0.1ml 加蒸馏水定容至10ml
样品处理: 
新鲜土样自然风干或 37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定操作表
混匀,室温显色 20min后,4000g25℃离心10min,用蒸馏水调零,540nm下读取各管吸
光值。标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-NR活性计算:
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol NO2ˉ的量为一个S-NR活力单位。
S-NRμmol /d/g=C标准×A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)×V反总÷W÷T=12×
A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)
C 标准管:标准管浓度,0.1μmol/mLV 反总:反应体系总体积,0.5mLT:反应时间,
1h=1/24dW:样本质量,0.1g

原创作者:青岛捷世康生物科技有限公司

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