山梨醇含量试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
测定意义：
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物
抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含
量变化。
测定原理：
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在655nm波长有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。
山梨醇的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，加入2mL
蒸馏水），研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸10分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，
常温离心10min，取上清液待测。
测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至655nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在 EP管中依次加入下列试剂）：
试剂（μL） 空白管 测定管
试剂 150 150
试剂二 140 140
样本 1000
蒸馏水 1000
混匀后室温静置15min，8000g，常温离心10min，取上清液测655nm下吸光值A，计算ΔA=A
测定管-A空白管。空白管只要做一管。
山梨醇含量计算：
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
2、按照样本质量计算
山梨醇含量（mg /g鲜重）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr
V1：加入样本体积，1mL；V2：加入提取液体积，2 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g
原创作者：青岛捷世康生物科技有限公司
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