柠檬酸合酶(CS）测试盒-可见分光光度法

试剂一：液体25mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：液体5mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：液体0.5mL×1 支，-20℃保存； 试剂四：液体25mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：粉剂×1 支，4℃保存，临用前加入800μL 蒸馏水，用不完的试剂仍4℃保存； 试剂六：粉剂×2 支，-20℃保存，临用前加入400μL 蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存； 试剂七：粉剂×1 支，-20℃保存，临用前加入800μL 蒸馏水，用不完的试剂仍-20℃保存；
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工作原理：
CS 催化乙酰CoA 和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的DTNB 转变成黄色的TNB，在412nm 处有特征吸光值。
测定意义：
CS（EC 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环第一个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。
标本处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
1 称取约0.1g 组织或收集500 万细胞，加入1mL 试剂一和10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2 将匀浆600g，4℃离心5min。
3 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
4 上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的CS（此步可选做）。
5 在步骤④中的沉淀中加入200uL 试剂二和2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3 秒，间隔10 秒，重复30 次），用于线粒体CS 测定。
订购流程：
    1、报价含普票、运费。
    2、常用试剂备货充足，除对温度要求极其严格的产品当天可发货。
    3、进口原装产品要3-6周的货期，详细情况请咨询客服。
    4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。
    5、如需代为检测，标本对环境温度高，可联系客服安排专人取样（限省内客户）。
    6、代测免收代测费，一周出结果。
    7、产品因运输途中包装破损请拒绝签收，做退回。我们将在24小时之内为您补发损坏产品
    8、如因单位财务制度原因，可申请先发货，报账后付款（此条款仅限医院、学校信誉良好
          客户）。
注意事项：
影响显色反应的主要因素有哪些？
影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶液的酸度、显色时间以及干扰离子等。
为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择最适宜的测量条件？
一般从以下几个方面来考虑：
①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择最大吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在最大吸收波长也有吸收,则应根据：吸收大，干扰小”的原则来选择测量波长
②调价溶液的浓度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内。
③选择适当的参比溶液。
在分析复杂样品时，如何消除干扰？
消除干扰方法主要有：
1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法；
4、分离干扰离子。
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合作单位：柠檬酸合酶(CS）测试盒-可见分光光度法

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原创作者：青岛捷世康生物科技有限公司

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